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現(xiàn)代藥理研究表明,新會(huì)陳皮中所含的揮發(fā)油、多糖、多酚、黃酮等多類成分都有很好的抗氧化作用。
一、新會(huì)陳皮揮發(fā)油的抗氧化作用
崔佳韻等對(duì)2016、2014、2013、 2011、2006 年5種不同年份新會(huì)陳皮揮發(fā)油的抗氧化活性進(jìn)行了評(píng)價(jià),利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH) 自由基清除實(shí)驗(yàn)、2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)自由基清除實(shí)驗(yàn)、羥基自由基清除實(shí)驗(yàn)和總還原能力測(cè)定實(shí)驗(yàn)綜合評(píng)價(jià)不同年份的新會(huì)陳皮揮發(fā)油的抗氧化能力。結(jié)果顯示,不同年份的新會(huì)陳皮揮發(fā)油均表現(xiàn)出DPPH、ABTS、羥基自由基清除能力和還原能力,且抗氧化效果與揮發(fā)油的體積分?jǐn)?shù)呈量效關(guān)系。并以2014年份的樣品具有最好的DPPH和ABTS自由基清除能力;2016年份的樣品具有最好的羥基自由基清除能力和總還原能力(圖4-1)。
圖4-1不同年份新會(huì)陳皮揮發(fā)油抗氧化能力
高蓓對(duì)不同貯藏年份的新會(huì)陳皮揮發(fā)油抗氧化活性進(jìn)行了研究,結(jié)果認(rèn)為不同貯藏年份新會(huì)陳皮揮發(fā)油抗氧化活性變化較大。DPPH 自由基清除能力的強(qiáng)弱順序是:新會(huì)陳皮(2008) >新會(huì)陳皮(2001) >新會(huì)陳皮(1998) >新會(huì)陳皮(2004) >新會(huì)陳皮(1994), 新會(huì)陳皮(2008) 的DPPH自由基清除能力比其他年份顯著增強(qiáng)(P<0.05)。 總抗氧化能力方面,新會(huì)陳皮(1994) 的FRAP值最高,為26. 89umol TE/g,而新會(huì)陳皮(2008) 值最低, 為11. 36mol TE/g;總抗氧化能力由大到小依次為:新會(huì)陳皮(1994)> 新會(huì)陳皮(1998) >新會(huì)陳皮間的增(2001)>新會(huì)陳皮(2004) >新會(huì)陳皮(2008),可以看出,隨著貯藏時(shí)增加,新會(huì)陳皮揮發(fā)油的總抗氧化能力是逐漸增強(qiáng)的,可能與a-蒎烯、β一蒎烯的含量增加有關(guān)。ABTS自由基清除能力由大到小順序依次為:新會(huì)陳皮(2001)>新會(huì)陳皮(1998) >新會(huì)陳皮(2004) >新會(huì)陳皮(2008) >,新會(huì)陳皮(1994)。隨著貯藏時(shí)間的增加,廣陳皮揮發(fā)油的ABTS自由基清除能力先增強(qiáng)后減弱。新會(huì)陳皮(2001) 的ABTS值最高,為26.48μmol TE/g。
二、新會(huì)陳皮多糖的抗氧化作用
莫云燕等研究 了新會(huì)陳皮多糖體外抗氧化作用,結(jié)果顯示新會(huì)陳皮多糖在體外能明顯清除羥自由基、DPPH自由基和還原Fe3+,并且體外抗氧化作用均隨其濃度的增而增大,,認(rèn)為新會(huì)陳皮多糖具有明顯的體外抗氧化作用。
張小英等探討了新會(huì)陳皮多糖對(duì)H2O2誘導(dǎo)的大鼠嗜鉻瘤細(xì)胞株(PC12)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)100μmol/ L H202誘導(dǎo)PC12細(xì)胞4小時(shí),細(xì)胞呈現(xiàn)明顯損傷形態(tài),細(xì)胞內(nèi)MDA含量升高,SOD 和GSH -Px活性降低。新會(huì)陳皮多糖可明顯改善PC12細(xì)胞損傷,顯著降低細(xì)胞MDA含量,極顯著提高SOD 和GSH - Px活性。認(rèn)為新會(huì)陳皮多糖對(duì)H202誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷具有明顯的保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與提高PC12細(xì)胞的抗氧化酶活性有關(guān)。
甘偉發(fā)等研究新會(huì)陳皮提取物中不同乙醇體積分?jǐn)?shù)沉淀的多糖分子質(zhì)量分布及其對(duì)PC12細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)新會(huì)陳皮粗多糖和透析處理后的多糖都具有一定的抗氧化活性,但脫色和脫蛋白處理后的多糖基本失去抗氧化活性。認(rèn)為新會(huì)陳皮提取物中多糖的分子質(zhì)量分布對(duì)抗氧化活性有一定影響; 多糖的分子組成(例如含有色素和蛋白質(zhì))與抗氧化活性存在密切關(guān)系。在陳思的研究中也表明新會(huì)陳皮粗多糖(CCP)對(duì)過氧化氫損傷的U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞有保護(hù)作用,在試驗(yàn)濃度2.500 ~0. 078mg/ mL范圍內(nèi)呈劑量依賴關(guān)系: CCP 脫蛋白后的多糖則未表現(xiàn)出抗氧化活性。
三、新會(huì)陳皮多酚的抗氧化作用
盛釗君等研究并比較了新會(huì)柑胎仔、1年青皮、5年陳皮及10年陳皮4種新會(huì)柑產(chǎn)品的功能成分及生理功效的差異。以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品,采用福林酚比色法測(cè)定4種樣品中的多酚總含量;以維生素C (Vc)為陽性對(duì)照品,采用分光光度計(jì)法評(píng)估4種樣品清除DPPH和ABTS自由基的能力(圖4 -2)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)4種乙醇提取物的新會(huì)陳皮多酚含量從高到低依次是柑胎仔(164μg/mg)、10年陳皮(98μg/mg)、1 年青皮(66ug/mg)、 5年陳皮(58μg/mg); 4種樣品清除DPPH自由基的能力從強(qiáng)到弱依次是柑胎仔(IC50= 91μg/mL)、10 年陳皮(IC50=234μg/mL)、5年陳皮(IC50 =384μg/mL)、1年青皮(IC50= 473ug/mL);清除ABTS自由基的能力從強(qiáng)到弱依次是柑胎仔(IC50= 18μg/mL)、1 年青皮(IC50=53ug/mL)、10年陳皮(IC50= 56μg/mL)、 5年陳皮(IC50= 90μg/mL)。認(rèn)為新會(huì)柑胎仔的多酚含量與體外抗氧化活性均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他3種樣品,抗氧化活性結(jié)果與多酚含量呈正相關(guān)。新會(huì)柑胎仔在功能食品的研究和開發(fā)中具有較大的應(yīng)用潛力。
四、新會(huì)陳皮黃酮的抗氧化作用
高蓓對(duì)比分析不同貯藏年份、不同采收期的廣陳皮和不同品種柑橘皮中黃酮類化合物組分和含量差異及其抗氧化活性差異,并研究6種黃酮單體的抗氧化活性,黃酮單體兩兩組合及有機(jī)酸、氨基酸分別與廣陳皮黃酮模擬體系之間的抗氧化協(xié)同作用,為“陳久者良”和“道地性”提供理論支持。結(jié)果表明,廣陳皮抗氧化能力隨貯藏時(shí)間增加總體呈下降趨勢(shì),不同貯藏年份廣陳皮的總黃酮含量與DPPH自由基清除能力和ABTS自由基清除能力呈正相關(guān),而與鐵離子還原/抗氧化能力法(FRAP)鐵還原能力相關(guān)性不明顯。不同采收期廣陳皮抗氧化能力為:青皮>微紅皮>大紅皮;不同采收期廣陳皮的總黃酮含量與DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和FRAP鐵還原能力呈正相關(guān)性。不同品種柑橘皮抗氧化能力存在一定的差異,南豐橘的抗氧化能力最強(qiáng)。對(duì)不同品種柑橘皮來說,其總黃酮含量和DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和FRAP鐵還原能力之間的相關(guān)性都不強(qiáng),其中,總黃酮含量和DPPH自由基清除能力之間的相關(guān)系數(shù)最大,為0.5044。同時(shí),采用ABTS法和FRAP法測(cè)定廣陳皮中6種黃酮化合物單體的抗氧化活性,分析了單體化合物兩兩之間、5種有機(jī)酸和20種氨基酸分別與廣陳皮黃酮模擬體系之間的抗氧化協(xié)同效應(yīng)。結(jié)果表明,6種黃酮類化合物中,橙皮苷的抗氧化活性最強(qiáng),其次是5-羥基-6,7,8,3',4’-五甲氧基黃酮。單體化合物兩兩組合時(shí),ABTS值除4’,5,7,8-四甲氧基黃酮和5-羥基-6,7,8,3',4' -五甲氧基黃酮兩兩混合表現(xiàn)為協(xié)同效應(yīng)外,其他4種單體化合物均表現(xiàn)為拮抗效應(yīng),當(dāng)川陳皮素與其他化合物混合時(shí)拮抗效應(yīng)較理論值顯著增強(qiáng)(P <0.05); FRAP值各單體均表現(xiàn)出顯著的協(xié)同效應(yīng)(P<0.05),其中橙皮苷的協(xié)同效應(yīng)最強(qiáng)。各有機(jī)酸和氨基酸在廣陳皮黃酮類化合物模擬體系中主要表現(xiàn)為拮抗效應(yīng),僅組氨酸和精氨酸顯示出協(xié)同效應(yīng)。
黃慶華課題組對(duì)新會(huì)陳皮提取物進(jìn)行了體外抗氧化實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)提取物對(duì)D-半乳糖致衰老模型小鼠有顯著效應(yīng),能使血、肝和腦的丙二醛(MDA)含量降低,使腦組織、血漿、肝組織超氧化歧化酶(SOD)活力提高,使血液中的谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力提高。
李嬈玲應(yīng)用中藥血清藥物化學(xué)研究的思路,對(duì)灌胃新會(huì)陳皮大鼠血清中提取物的原型成分進(jìn)行分離及鑒定;從提取物中分離提純出6個(gè)多甲氧基黃酮類化學(xué)成分,其中4個(gè)成分被檢出為入血的原型成分,并構(gòu)建了細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷模型,對(duì)6個(gè)多甲氧基黃酮類成分和提取物進(jìn)行了抗氧化活性的細(xì)胞篩選試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞后與正常對(duì)照組比較,MDA含量升高,GSH -Px和SOD活性降低,證明已成功構(gòu)建PC12細(xì)胞體外氧化應(yīng)激模型。而受試成分處理組對(duì)SOD和GSH-Px活性降低具有抑制作用,并使MDA含量降低。入血成分對(duì)細(xì)胞的這種保護(hù)作用較未入血的成分明顯。推測(cè)新會(huì)陳皮提取物中的多甲氧基黃酮類成分,可能通過提高SOD和GSH-Px活性和降低MDA含量,減少氧化應(yīng)激對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損傷,從而發(fā)揮抗氧化作用。
另有報(bào)道對(duì)新會(huì)陳皮所含成分川陳皮素的抗氧化作用進(jìn)行研究,認(rèn)為其作用主要是通過干擾NF - kB DNA結(jié)合活性因子及抑制活性氧的產(chǎn)生,而起到抗氧化效應(yīng)。同樣地,川陳皮素能夠抑制有機(jī)自由基和羥自由基的產(chǎn)生,抑制由LPS激活的RAW 264. 7細(xì)胞中NF一kB DNA結(jié)合活性因子和活性氧的繁殖,從而影響由LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)的活性氧的產(chǎn)生,并呈現(xiàn)量效關(guān)系。
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